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Evaluación de expresión génica
A definir por cotización
El servicio consiste en la evaluación cuantitativa de la expresión génica en microorganismos o líneas celulares mediante distintas metodologías, según los requerimientos del proyecto:
1. RT-qPCR: cuantificación ARN mensajero (ARNm) a partir de ARN total, ideal para validar genes específicos bajo distintas condiciones.
2. Reporteros fluorescentes (ej. GFP, mCherry): cuantificación indirecta de expresión génica mediante señal fluorescente en cultivos celulares o bacterianos.
Especificaciones técnicas:
Este proceso requiere de la utilización de los siguientes equipos:
1. Termociclador en tiempo real
2. Lector de microplacas (fluorescencia)
3. Espectrofotómetro UV/VIS
4. Incubadora-shaker
5. Sistema de electroforesis (RNA total)
6. Campana de bioseguridad (cultivo microbiano)
Alcance del servicio:
1. Diseño experimental de estudio de condiciones a evaluar para expresión génica
2.Extracción de ARN (si aplica) y verificación de calidad.
3. Síntesis de cDNA y RT-qPCR para genes específicos.
4. Cuantificación de fluorescencia.
5. Normalización con controles internos o curvas de crecimiento.
6. Análisis comparativo entre condiciones y entrega de informe técnico.
Requisitos de las muestras:
1. Información respecto de las secuencias génicas, promotores, reguladores.
2. Cepa a utilizar (bacteria, levadura)
3. Cepas construidas en glicerol stock o liofilizadas (dependiendo de si el servicio no incluye la construcción de las cepas con el constructo de expresión)
Proceso que implica el servicio:
1. Recepción y verificación de muestras.
2. Extracción y control de calidad de ARN.
3. RT-qPCR con análisis de expresión relativa (ΔΔCt) o absoluta.
4. Cultivo y medición de expresión mediante fluorescencia de reportero.
5. Análisis comparativo y procesamiento de datos.
6. Entrega de informe técnico con resultados, gráficos y datos crudos.
Finalidad:
1. Medir niveles de expresión génica en condiciones experimentales controladas.
2. Validar promotores, construcciones genéticas o elementos reguladores.
3. Comparar cepas modificadas o condiciones ambientales.
4. Confirmar silenciamiento, sobreexpresión o respuesta a inductores.
Monto:
A definir por cotización
Plazos:
A definir en cada caso
Output del servicio:
Informe técnico e informe de resultados.
Archivos crudos de qPCR, absorbancias.